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田克恭:使用gD抗体检测试剂盒进行猪伪狂犬病免疫效果评价更科学 |
[ 发布日期:2023-7-5 14:49:12 阅读次数:627 ] |
在广东省畜牧兽医学会成立70周年庆典暨第32届广东省畜牧兽医科技大会兽用生物制品高质量发展论坛现场,普莱柯生物工程股份有限公司副总经理/国家兽用药品工程技术研究中心主任田克恭分享了不同场景下猪病检测方法的选择与应用。
我国猪病种类多、型别多、变异快,并且疫苗种类多,免疫程序复杂,这些因素使得我国疫病诊断背景复杂,做好疫病诊断的难度比国外更大。
“没有敏感性和特异性都是100%的检测方法和试剂盒。”田克恭说道。他推荐根据检测目的选择2-3种方法开展平行试验或系列试验,以提升检测准确性。
他举例说明了针对不同的检测目的与应用场景(如感染诊断、免疫评估、疫病净化)选择检测方法和诊断试剂盒应注意的要点。
田克恭认为,在选择感染诊断用试剂盒时,应根据动物疫病发生与发展过程,在感染诊断中选择不同检测方法应用。如PCR检测适用于急性发病期,抗体检测适用于康复期或无症状感染者。
以非洲猪瘟为例:2019年病毒流行感染滴度高、毒力强,因此早期核酸检测是首选,感染后期采用ELISA抗体检测试剂盒可发挥巨大作用。到了2023年上半年,感染后无明显症状,病毒载量低,在核酸检测的同时,选择敏感性更高的抗体检测试剂盒至关重要。
在进行免疫评估时应选择与攻毒保护或病毒中和抗体具有良好相关性的试剂盒。田克恭以口蹄疫为例介绍了目前常用的检测方法,包括病毒中和试验、液相阻断ELISA、固相阻断ELISA等,这些方法各有优劣。理想的方法既与免疫保护相关性好,也无生物安全风险,同时具有良好的便捷性和稳定性。固相竞争ELISA或能实现这些需求。他详细介绍了固相竞争ELISA抗体检测试剂盒的开发。普泰公司构建的FMDV固相竞争ELISA与液相阻断的符合率达到95%以上,与攻毒保护的符合率达到80%左右。
在选择净化监测用试剂盒上,田克恭则以伪狂犬为例进行了详细阐述。他介绍,目前通常采用PRV gE基因缺失疫苗与鉴别诊断试剂盒配合的净化策略,通过检测gE抗体鉴别野毒感染,进而实现扑灭疫病消除感染。此外,在伪狂犬病净化过程中,还应对猪群免疫效果进行评估。目前一般采用gB/gD蛋白抗体检测方法进行猪伪狂犬病疫苗免疫效果评估,但他认为,在免疫效果评估上选择gD蛋白要优于gB蛋白。田克恭解释,gD蛋白是伪狂犬病最重要的免疫保护相关蛋白,更适用于作为免疫效果评估的诊断靶标,因此使用gD抗体检测试剂盒用于免疫效果评价更科学。
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